以下內(nèi)容中，小編將對(duì)核酸自動(dòng)提取儀的相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行著重介紹和闡述，希望本文能幫您增進(jìn)對(duì)核酸自動(dòng)提取儀的了解，和小編一起來(lái)看看吧。

一、核酸自動(dòng)提取儀及其分類(lèi)

核酸自動(dòng)提取儀又名核酸自動(dòng)純化儀，是應(yīng)用配套的核酸提取試劑，來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸提取工作的儀器。廣泛應(yīng)用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。

1.根據(jù)儀器型號(hào)大小不同劃分

自動(dòng)液體工作站：自動(dòng)液體工作站是功能非常強(qiáng)大的設(shè)備，液體分液、吸液等自動(dòng)完成，甚至能通過(guò)整合擴(kuò)增、檢測(cè)等功能，實(shí)現(xiàn)標(biāo)本提取、擴(kuò)增、檢測(cè)全自動(dòng)化。大型自動(dòng)液體工作站因?yàn)樵O(shè)備成本高昂，運(yùn)行成本高，適合一次提取幾千個(gè)同一種類(lèi)標(biāo)本，所以真正得到應(yīng)用的比較少。

小型自動(dòng)核酸提取儀：利用封裝好的配套試劑自動(dòng)完成提取純化過(guò)程;小型自動(dòng)化的儀器，因?yàn)閮x器設(shè)備和運(yùn)行成本低，操作方便得到越來(lái)越多的應(yīng)用。

2.根據(jù)提取原理不同劃分

離心柱法的儀器：離心柱法核酸提取儀主要采用離心機(jī)和自動(dòng)移液裝置相結(jié)合的方法，通量一般在1-12個(gè)樣本，操作時(shí)間和手工提取相差無(wú)幾，不能提高實(shí)際工作效率，且價(jià)格昂貴，不同型號(hào)儀器的耗材也不能通用。

磁珠法的儀器：以磁珠為載體，利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸，在低鹽高PH值下與核酸分離的原理，再通過(guò)移動(dòng)磁珠或轉(zhuǎn)移液體來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的整個(gè)提取純化過(guò)程。由于其原理的獨(dú)特性，所以可設(shè)計(jì)成很多種通量，既可以單管提取，也可以提取8-96個(gè)樣本，且其操作簡(jiǎn)單快捷，提取96個(gè)樣本僅需30-45min，大大提高了實(shí)驗(yàn)效率，且成本低廉，是目前市場(chǎng)上的主流儀器。

二、影響核酸提取效率的因素

一般核酸提取的主要步驟分為四步：裂解、吸附、洗滌和洗脫，每一步出現(xiàn)問(wèn)題都會(huì)影響磁珠的提取效率。下面就具體介紹一下影響核酸提取效率的一些因素。

1、樣本裂解是裂解細(xì)胞或病原體，釋放里面的核酸。影響裂解的主要因素有裂解液的成分及裂解的溫度和時(shí)間。

裂解液成分：對(duì)于一些難裂解的樣本，可以通過(guò)提高胍鹽濃度以及表面活性劑濃度來(lái)增強(qiáng)裂解液的裂解能力。

裂解溫度和時(shí)間：提高溫度和增加裂解時(shí)間可以讓細(xì)胞裂解更徹底，得到更多核酸，需要摸索合適的溫度和時(shí)間;溫度過(guò)高或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，也有可能導(dǎo)致核酸斷裂或醇類(lèi)揮發(fā)導(dǎo)致的提取效率下降。

2、吸附是磁珠吸附核酸的能力，影響吸附能力的有磁珠的吸附能力以及結(jié)合緩沖液的結(jié)合能力。磁珠吸附能力受到磁珠比表面積以及修飾基團(tuán)的密度影響?？筛鶕?jù)實(shí)際樣本選擇磁珠粒徑和修飾基團(tuán)。

自動(dòng)核酸提取儀

3、洗滌是去除DNA以外的RNA、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。關(guān)系到核酸的純度，磁棒的振蕩幅度和混合時(shí)間會(huì)影響洗滌效率。磁棒振蕩幅度太小或混合時(shí)間太短，有雜質(zhì)殘留在磁珠上會(huì)影響磁珠吸附核酸的能力。振蕩太劇烈或時(shí)間太長(zhǎng)，會(huì)丟失部分核酸或造成核酸的斷裂、降解，得率下降。

4、 洗脫是解離吸附在磁珠上的DNA，得到純度和濃度均很高的DNA，直接影響核酸得率，影響洗脫效率的因素有磁珠的干燥程度以及洗脫溫度和時(shí)間。磁珠未充分晾干，可能會(huì)有醇類(lèi)等雜質(zhì)殘留，影響后續(xù) PCR 反應(yīng);磁珠過(guò)分干燥，核酸可能會(huì)干結(jié)在磁珠上，導(dǎo)致洗脫效率下降。適當(dāng)提高洗脫溫度和時(shí)間，有利于核酸從磁珠上游離下來(lái)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度過(guò)高，核酸有可能會(huì)降解，需要把握其中的平衡。

全自動(dòng)核酸提取儀能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、高通量操作，適用于疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血、出入境檢驗(yàn)檢疫、食藥監(jiān)、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測(cè)、食品檢測(cè)、教學(xué)、科研、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域，尤其是對(duì)各地區(qū)爆發(fā)疫情需大規(guī)模核酸檢測(cè)起著至關(guān)重要的作用。

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