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[導(dǎo)讀]生化分析儀采用的光源一般是發(fā)射寬波段范圍的連續(xù)輻射,然而,在實(shí)際測(cè)量時(shí),我們希望采用窄譜帶或單色光,這是由于:①采用窄帶輻射才有可能將彼此非常接近的吸收帶分開;②采用窄帶才可能在最大吸收波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)量

生化分析儀采用的光源一般是發(fā)射寬波段范圍的連續(xù)輻射,然而,在實(shí)際測(cè)量時(shí),我們希望采用窄譜帶或單色光,這是由于:①采用窄帶輻射才有可能將彼此非常接近的吸收帶分開;②采用窄帶才可能在最大吸收波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)量,從而提高測(cè)定靈敏度;③在定量分析時(shí),采用窄帶才能較好地遵守比爾定律。因此,必須采用適當(dāng)?shù)难b置將寬波段復(fù)合光分解為窄帶或單色光。單色器是使不同波長(zhǎng)的光以不同的角度發(fā)散的組件,按色散元件的不同,可分為棱鏡單色器、光柵單色器和濾光片式單色器。

  棱鏡單色器簡(jiǎn)單叉便宜,但其色散是彎曲且非線性的,長(zhǎng)波色散率較小,短波色散率較高,因此欲得到相同的光譜強(qiáng)度,狹縫寬度要隨波長(zhǎng)而改變,并且光譜線間隔不同為非勻排光譜。

  光柵的色散率大,色散角與波長(zhǎng)成線性關(guān)系,分辨率高,光譜范圍寬。采用光柵的儀器設(shè)計(jì)時(shí)須注意光譜疊級(jí),檢測(cè)靈敏度及光學(xué)布局(前分光或后分光)等因素的影響。光柵的主要缺點(diǎn)是有次級(jí)光譜干擾分析,且雜散光的影響較大,光柵的價(jià)格昂貴。

  濾光片是一種簡(jiǎn)單而廉價(jià)的波長(zhǎng)選擇器,其作用是選擇性地透過(guò)一定波長(zhǎng)范圍的光。濾光片的濾光特性用最大透光波長(zhǎng)(中心波長(zhǎng))和譜帶半寬度(有效帶寬)來(lái)描述。最大透光

  波長(zhǎng)是指在該波長(zhǎng)處輻射有最大透光率,而譜帶半寬度是指最大透光率的一半處譜帶的波長(zhǎng)范圍(見(jiàn)圖1 ),以納米(nm)表示,譜帶半寬度越小,貝刂單色光的純度越高,一般濾光片的譜帶半寬度為10 nm。

  檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度與單色光的純度是有很大關(guān)系的,所以,應(yīng)選擇半寬度較小的窄帶濾光片。同時(shí),為了能夠得到較好的紫外光強(qiáng)度(340 nm),我們選擇了透過(guò)率較高的濾光片。而為了不使578 nm和630 nm處得到的光強(qiáng)度溢出計(jì)算范圍,選擇了透過(guò)率較低的濾光片(見(jiàn)表1)。

  圖1 譜帶半寬度

  濾光片的透光特性隨著溫度的變化而變化,溫度升高時(shí),不但它的半寬度會(huì)加寬,峰值波長(zhǎng)也會(huì)起變化。因此在光源燈和濾光片裝置比較接近的光學(xué)系統(tǒng)中,使用隔熱玻璃擋在燈泡和濾光片之間。在安裝光源燈時(shí)需要注意,別讓它與隔熱玻璃直接接觸,以減少導(dǎo)熱。

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